口蹄疫(fmd)是感染牛、綿羊、豬和山羊等偶蹄獸的一種傳染性很強(qiáng)的疾病,它給畜牧業(yè)造成了嚴(yán)重威脅。fmd在非洲、南美洲和亞洲的很多國(guó)家呈現(xiàn)地方流行性。fmd帶來(lái)了非常大的經(jīng)濟(jì)損失。因此需要一種靈敏的檢測(cè)方法在幫助減少誤殺未感染畜群的同時(shí),也有利于口蹄疫的監(jiān)測(cè)。口蹄疫病毒具有多型性,而其流行特點(diǎn)和臨床癥狀相同,其病毒屬于哪一型,需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查才能確定。
口蹄疫病變典型易辨認(rèn),故結(jié)合臨床病學(xué)調(diào)查不難作出初步診斷。其診斷要點(diǎn)為:
1、發(fā)病急、流行快、傳播廣、發(fā)病率高,但死亡率低,且多呈良性經(jīng)過(guò);
2、大量流涎,呈引縷狀;
3、口蹄瘡定位明確(口腔粘膜、蹄部和乳頭皮膚),病變特異(水泡、糜爛);
4、惡性口蹄疫時(shí)可見(jiàn)虎斑心;
5、為進(jìn)一步確診可采用動(dòng)物接種試駿、血清學(xué)診斷及鑒別診斷等。
蹄疫病原檢測(cè)方法
1、蹄疫反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR),用于檢測(cè)疑似感染動(dòng)物水皰皮或水皰液中所有血清型口蹄疫病毒,適用于口蹄疫病毒的檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
原理:利用異硫氰酸胍方法提取RNA,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以RNA為模板,以引物為起點(diǎn)合成與RNA模板互補(bǔ)的cDNA鏈。利用西安天隆科技有限公司生產(chǎn)的DTC型基因擴(kuò)增儀,在TaqDNA聚合酶的作用下,經(jīng)高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán),使特異性DNA片段的基因拷貝數(shù)放大一倍。經(jīng)過(guò)35個(gè)循環(huán),最終使基因放大數(shù)百萬(wàn)倍。將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳,經(jīng)溴化乙錠染色后,在紫外燈照射下,肉眼可見(jiàn)DNA片段的擴(kuò)增帶。該方法可以檢測(cè)所有亞型的口蹄疫病毒,檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,需進(jìn)一步采用分型診斷試劑盒進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)。
2、血清學(xué)試驗(yàn),ELISA是目前檢測(cè)FMDV感染較為常用的診斷方法,其與補(bǔ)結(jié)試驗(yàn)、中和試驗(yàn)及間接血凝抑制、免疫擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)相比較、具有靈敏、快速、價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn)。
溫馨提示:口蹄疫應(yīng)注意與柯薩奇病毒、單純皰疹病毒等引起的水皰作鑒別診斷。柯薩奇病毒感染的患者可有明顯的發(fā)熱以及心肌酶譜的損害,查CK-MB以及肌鈣蛋白T均增高,病毒核酸PCR檢查可見(jiàn)陽(yáng)性。單純皰疹病毒感染一般是引起片狀水泡,可伴有疼痛,一般病史在7天可自愈。