1、輔助生殖技術(shù)胚胎植入前遺傳學(xué)診斷
此法也稱第三代試管嬰兒，指在IVF-ET的胚胎移植前，取胚胎的遺傳物質(zhì)進行分析，診斷是否有異常，篩選健康胚胎移植，防止遺傳病傳遞的方法。檢測物質(zhì)取4～8個細胞期胚胎的1個細胞或受精前后的卵第一、二極體。取樣不影響胚胎發(fā)育。檢測用單細胞DNA分析法，一是聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)，檢測男女性別和單基因遺傳病;另一種是熒光原位雜交(FISH)，檢測性別和染色體病。早在1964年Edwards就提出了PGD的思想。
1989年HandysideAH首先將PGD成功應(yīng)用于臨床，用PCR技術(shù)行Y染色體特異基因體外擴增，將診斷為女性的胚胎移植入子宮獲妊娠成功。開初的PGD都是用PCR或FISH檢測性別，選女性胚胎移植，幫助有風(fēng)險生育血友病A、進行性肌營養(yǎng)不良等X連鎖遺傳病后代的夫婦妊娠分娩出一正常女嬰。但按遺傳規(guī)律，此法無疑否定健康男孩的出生，而允許攜帶者女孩繁衍，并不能切斷致病基因的傳遞。1992年，美國首先報道用PCR檢測囊性纖維成功，并通過胚胎篩選，誕生了健康嬰兒。
之后，α-1-抗胰島素缺乏癥、家庭黑?性癡呆、色素沉著視網(wǎng)膜炎等多種單基因遺傳病的PGD檢測方法建立，PGD進入對單基因遺傳病的檢測預(yù)防階級。
1993年以后，由于晚婚晚育使大齡產(chǎn)婦人數(shù)增多，而45歲以上的婦女染色體異常率高、自然妊娠容易分娩18-3體和21-3體愚型兒，于是PGD的工作熱點轉(zhuǎn)向了對染色體病的檢測預(yù)防，檢測用FISH。由于取樣多用第一極體，篩選出的為未授精卵，須進行單精子胞漿內(nèi)注射，待培養(yǎng)發(fā)育成胚胎后移植。據(jù)統(tǒng)計，中途停止發(fā)育的胚胎，其染色體異常率達70%，所以選擇染色體正常的胚胎移植，還能提高IVF-ET的成功率[9]。從理論上講，凡能診斷的遺傳病，應(yīng)該都能通過PGD防止其傳遞，但限于目前的技術(shù)條件，PGD的適應(yīng)證還有一定的局限。優(yōu)生是世界共同關(guān)注的問題，隨著分子生物技術(shù)的發(fā)展和更多遺傳病基因被確定，相信一些準(zhǔn)確、安全的遺傳診斷技術(shù)會不斷出現(xiàn)，PGD技術(shù)會日趨完善，更好的造福人類。
2、輔助生殖技術(shù)臨床意義
輔助生殖技術(shù)是指采用醫(yī)療輔助手段使不育夫婦妊娠的技術(shù)，包括人工授精和體外受精-胚胎移植及其衍生技術(shù)兩大類。試管嬰兒就是使用該技術(shù)的體外受精，胚胎移植方法生育的嬰兒。世界首例試管嬰兒的誕生被譽為繼心臟移植成功后20世紀(jì)醫(yī)學(xué)界的又一奇跡，激發(fā)了全球許多國家研究這一高新技術(shù)的熱潮。
據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)評估，每7對夫婦中約有1對夫婦存在生殖障礙。我國近期調(diào)查，國內(nèi)不孕癥者占已婚夫婦人數(shù)的10%，比1984年調(diào)查的4.8%增加一倍多，發(fā)病率呈上升趨勢。我國更受傳宗接代觀念影響，多數(shù)家庭盼子心切，使不育夫婦承受著極大的心理壓力，甚至引發(fā)離異、婚外戀之類家庭乃至社會的問題。ART的直接效應(yīng)是使不育夫婦實現(xiàn)妊娠生子的愿望，由不育引發(fā)的相關(guān)問題自然會隨之得到解決。臨床統(tǒng)計，不育患者中約20%的夫婦，不借助ART就根本無法生兒育女。
但是，也有人認為ART違背計劃生育少生的要求，因而持否定態(tài)度。其實只要堅持只對準(zhǔn)生的夫婦才給ART治療，就不會引發(fā)超生的負面效應(yīng)，相反，還有利于控制人口增長工作的順利進行。因為ART能幫助做過絕育手術(shù)的夫婦恢復(fù)生育能力，具有生殖保險作用，這就使那些該做絕育手術(shù)，但又擔(dān)心術(shù)后如遇子女夭折時無法再生孩子的夫婦，打消顧慮，自愿接受手術(shù)。
ART的生殖保險作用自然也適用于參戰(zhàn)士兵、從事高危職業(yè)、長期接觸放射線或有毒物質(zhì)的男性及需要進行睪丸、附睪手術(shù)或放療、化療的患者，可事先將他們的精子冷凍存儲，以備一旦身亡或生精功能受損，需生殖時使用。
計劃生育不僅要求少生，還要求優(yōu)生，保證國家人口素質(zhì)的提高。目前已發(fā)現(xiàn)人類遺傳病約4000種，人群中約1/3的人存在這樣或那樣的遺傳缺陷。
我國先天殘疾人口高達幾千萬，每年還要新生有遺傳缺陷人口20多萬，實行優(yōu)生勢在必行。而ART在臨床中正好能遏止遺傳病的傳遞，是實現(xiàn)優(yōu)生的重要手段。有遺傳缺陷的育齡夫婦，不論是否不育，都可采用ART的供精、供卵、供胚或胚胎移植前遺傳學(xué)診斷(PGD)等方法，切斷導(dǎo)致遺傳病發(fā)生的有缺陷基因與異常染色體和后代傳遞，保證生育健康嬰兒。
另外，ART還是人類生殖過程、遺傳病機制、干細胞定向分化等研究課題的基礎(chǔ)，ART的臨床應(yīng)用，會為這些課題的深入研究積累經(jīng)驗，創(chuàng)造發(fā)展條件，推動醫(yī)學(xué)及生命科學(xué)的不斷發(fā)展進步。
3、輔助生殖技術(shù)簡介
輔助生殖技術(shù)是人類輔助生殖技術(shù)(AssistedReproductiveTechnology，ART)的簡稱，指采用醫(yī)療輔助手段使不育夫婦妊娠的技術(shù)，包括人工授精(ArtificialInsemination，AI)和體外受精-胚胎移植(InVitroFertilizationandEmbryoTransfer，IVF-ET)及其衍生技術(shù)兩大類。試管嬰兒就是使用該技術(shù)的體外受精———胚胎移植方法生育的嬰兒。世界首例試管嬰兒的誕生被譽為繼心臟移植成功后20世紀(jì)醫(yī)學(xué)界的又一奇跡，激發(fā)了全球許多國家研究這一高新技術(shù)的熱潮。
4、輔助生殖技術(shù)卵泡漿內(nèi)單精子顯微注射
這一技術(shù)是在針對男性精子數(shù)量不足，功能異常導(dǎo)致受精障礙所采取的體外受精的微滴法、透明帶部分切除法及透明帶下授精等方法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。1992年P(guān)alerme等報道了用該技術(shù)授精的首例試管嬰兒誕生。
該技術(shù)又稱第二代試管嬰兒，其操作方法是，不用進行精子的誘導(dǎo)獲能處理，只須選擇一個形態(tài)正常，緩慢運動的精子先予以制動。方法用注射針擠壓精子尾部，稍微擦破細胞質(zhì)膜，誘導(dǎo)精子從擦破點釋放精子細胞質(zhì)體因子激活卵細胞，卵細胞的激活對ICSI的正常受精至關(guān)重要，接著按尾先頭后的順序吸精子放入注射針，再通過顯微操作，將精子注入卵胞漿內(nèi)，即完成受精。其他技術(shù)環(huán)節(jié)同于常規(guī)IVF-ET。對精道不通的患者可進行附睪穿刺，如吸出物中無精子，則從睪丸取活組織分離精子，或取精細胞激活后使用。
適應(yīng)證為:嚴重少、弱畸精癥、輸精管阻塞、先天性雙側(cè)輸精管缺如以及輸精管結(jié)扎后子女傷亡，吻合輸精管失敗或無法吻合者。ICSI是治療男性不育的有效方法，但目前研究揭示，嚴重少、弱精癥是由染色體鑲嵌型異常引起，先天性雙側(cè)輸精管缺如則常與囊性纖維膜傳導(dǎo)基因突變有關(guān)，兩者都是遺傳病[2]，對這兩種患者治療前應(yīng)告知遺傳風(fēng)險，妊娠后需進行詳細產(chǎn)前診斷，有異常須終止妊娠，或在胚胎移植前進行遺傳學(xué)診斷(PGD)，篩選優(yōu)質(zhì)胚胎移植。
5、輔助生殖技術(shù)體外受精-胚胎移植
該技術(shù)是將從母體取出的卵子置于培養(yǎng)皿內(nèi)，加入經(jīng)優(yōu)選誘導(dǎo)獲能處理的精子，使精卵在體外受精，并發(fā)育成前期胚胎后移植回母體子宮內(nèi)，經(jīng)妊娠后分娩嬰兒。由于胚胎最初2天在試管內(nèi)發(fā)育，所以又叫試管嬰兒技術(shù)。
6、輔助生殖技術(shù)人工授精
(AI)是以非性交方式將精子置入女性生殖道內(nèi)，使精子與卵子自然結(jié)合，實現(xiàn)受孕的方法。人類最早一例成功的AI治療是JohnHunter于1790年為嚴重尿道下裂患者輔助生殖技術(shù)(精子庫)圖片的妻子進行的配偶間人工受精。至今雖已200多年，但仍是常用的有效有助孕技術(shù)。由于精液來源不同，AI分夫精人工授精(AIH)和供精(非配偶)人工授精(AID)。
兩者適應(yīng)證不同，AIH治療，(1)性交障礙;(2)精子在女性生殖道內(nèi)運行障礙;(3)少、弱癥。AID治療:(1)無精癥;(2)男方有遺傳疾病;(3)夫妻間特殊性血型或免疫不相容。實施AID治療時，供精者須選擇身體健康，智力發(fā)育好，無遺傳病家族史的青壯年。還須排除染色體變異、乙肝、丙肝、淋病、梅毒，尤其是艾滋病(HIV)。血型要與受者丈夫相同。供精精子應(yīng)冷凍6個月，復(fù)查HIV陰性方可使用。因HIV的感染有6個月左右的潛伏期，此時診斷不易確定，所以供精精子一般應(yīng)從精子庫獲取。